永劫无间拥有超过20位风格迥异的英雄人物，涵盖控制、输出、机动、辅助四大定位，主流强势角色包括宁红夜、特木尔、迦南、季沧海、胡桃、沈妙、顾清寒、无尘、岳山、天海等，新英雄甘璇、方诺、李寻欢也已加入战局，适配单排、三排与征神之路等多种模式。
控制类英雄是团战核心，宁红夜F1可踢击沉默敌人，F2造成高额伤害并附带减疗，V1大范围群体眩晕、V2单体强沉默，适配先手开团与反打，实战中可配合阔刀蓄力或长剑剑气打爆发。特木尔F能弹开周围敌人并防御远程攻击，V生成沙阵封禁闪避与钩锁，强制敌人近战博弈，三排中可配合队友集火，决赛圈控场能力极强。无尘兼具位移与阵控，F可瞬移并留下镜像，V生成大范围结界限制敌人进出，适合拉扯与分割战场，单排中可利用镜像骗振、逃生或反打。
输出与机动类英雄主打爆发与拉扯，季沧海F燎原劲提升攻速移速并附带灼烧，V大幅强化近战伤害，正面缠斗与冲阵能力突出，搭配太刀或匕首可快速打出连招压制。迦南作为经典刺客，F追魂可短距隐身位移，V强化隐身并提升移速，擅长偷袭、收割残血与脱离战场，单排中可利用机动性游走发育，避免正面硬刚。顾清寒F冰霜技能可冻结敌人或自身无敌，V大范围冰场减速并刷新技能，残血反打与拉扯能力顶尖，搭配长剑可实现破冰一套秒，三排中可冰控多人协助队友输出。妖刀姬爆发极高，F可突进并附加霸体，V大范围斩击附带无敌，适合单排快速击杀与三排切后，但需注意大招释放时机避免空大。
辅助与重装类英雄保障团队生存与战场压制，胡桃是核心奶妈，F持续回血、V复活队友并大范围回血，操作简单易上手，三排中需时刻关注队友血量，利用钩索快速支援，避免被集火秒杀。沈妙兼具支援与机甲输出，F1受击后撤击退敌人、F2架枪沉默，V1召唤机甲近战输出、V2放置信标供队友登机，三排中可远程救援倒地队友并提供护甲加成，适配多种阵容。岳山化身武将后大范围劈砍，30秒强势期可清理成片敌人，适合冲阵与分割战场，搭配阔刀蓄力可打出高额AOE伤害，强势期结束后需及时撤退避免虚弱期被反打。天海奥义可变大佛抓取敌人，团战中优先抓取敌方输出位，为队友创造输出窗口，搭配金刚指魂玉可强化控制，残血时可骗振接反击连招反杀。
新英雄甘璇、方诺、李寻欢拓展战术选择，甘璇F1穿墙支援并提供护盾、V2强制回溯战局，适合拉扯与反打。方诺以傩舞技能后撤并留下爆炸傩面，V召唤天祀傩面进入神临状态，擅长控场与持续输出。李寻欢以飞刀为武器，技能附带穿透与减速，适合中距离消耗与收割。实战中需根据英雄定位搭配武器与魂玉，控制类适配阔刀或长剑打爆发，输出类适配太刀或匕首打连招，辅助类优先保障生存与支援，重装类侧重冲阵与控场，同时需熟悉英雄克制关系，如宁红夜克制迦南、特木尔克制季沧海等，提升对战胜率。
